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引言:應急醫療器械多數企業來自服裝加工等傳統行業,對于微生世界的很多事物很難理解,特別是有關微生物的計算。本文為大家科普微生物檢測中的梯度稀釋,我盡量用通俗的語言幫大家理解這個過程。
怎么理解微生物檢測中的梯度稀釋?
我以口罩、防護服微生物檢測指標為例說明。
一、介紹梯度稀釋之前,先理解幾個前提條件:
1.檢測結果的單位一般有兩種:CFU/g和CUF/件,本文以應用較多的CFU/g為單位講解;
2.標準狀況下(t=4℃),水的密度=1g/cm3=1g/ml ,低濃度的洗脫液我們在實驗計算中近似取1g/ml;
3.洗脫液的數量的確定考慮2個方面,一是洗脫液具備洗脫效果(例如至少能夠浸泡樣品);二是洗脫液的重量+樣品的重量是10倍、100倍等10的梯度倍數,便于后續梯度稀釋及結果統計。
二、梯度稀釋相關計算及說明:
取10g口罩樣品,使用90ml洗脫液洗脫,得到100ml溶液(樣品稀釋倍數為10倍),取1ml洗脫液到培養皿培養中培養,得到Ncfu,計算:N*100/10=10N(CFU/g)。
解釋一下:
1. 90ml溶液中包含10g樣品,換算成質量即100g溶液中含有10g樣品;1ml(即1g)洗脫液中含有的樣品重量為0.1g;
2. 實驗得出1ml溶液中含有的CFU數量為N,即0.1g樣品中含有的CFU數量為N;
3. 我們要求的單位是CFU/g,即每克樣品中含有多少CFU,所以,0.1g樣品中含有的CFU數量*10即是1g樣品含有的CFU數量。本例中即是10N。
從100ml洗脫液中取10ml,加入90ml稀釋液二次梯度稀釋的計算方法和解釋與上述同理。有不清楚的地方,也可以隨時方便與葉工18058734169聯系。